指将红细胞悬浮于盐水介质中用于检测红细胞抗体，主要筛查IgM类抗体，而不能检测IgG类的抗体。其灵敏度偏低，温度、抗体效价、反应时间等影响检测结果，一些弱的凝集或稀有抗体不能被检测到。

利用低离子溶液让抗体易于接近红细胞表面抗原，通过聚凝胺介质降低红细胞表面的负电荷，从而缩短红细胞之间的正常距离，使正常红细胞形成可逆的非特异性凝集，同时也使IgG类抗体直接凝集红细胞，加入重悬液后非特异性凝集散开，而抗体介导的特异性凝集不会消失。其灵敏度比盐水介质法高，可用来检测IgG类抗体。本方法用时短，试剂及设备成本最低，敏感度高（尤其对Rh系统）。但待测样本不能使用肝素作为抗凝剂，试验温度、加样比例、结果观察时间都会影响实验判读。对Kell系统检测较不灵敏，若需检测Kell系统抗体，须加做抗人球蛋白试验。

IgG类不规则抗体通过37℃孵育，可与相应的红细胞表面抗原结合，抗原抗体作用使红细胞致敏，但不能产生肉眼可见凝集，加入抗人球蛋白试剂，与红细胞上不完全抗体结合，出现可见凝集。反应温度、离子强度、反应时间、抗原与抗体的比例、试剂质量等影响检测结果。

某些蛋白水解酶能破坏红细胞表面抗原，使一些隐蔽抗原暴露，促进抗原抗体反应，如M、N、S、s、Fy ^a、Fy ^b等能被显著破坏；能增强血清中Rh、Kidd血型系统抗体的检测效果/检出率。酶试剂活性、酶的选择、酶处理时间等影响检测结果。

抗原抗体的凝集反应的强度与反应条件、检测方法、反应介质相关。IgM类的抗体在4℃的凝集强度明显大于室温，37℃会有减弱；酶法对Rh、Kidd血型系统的检测效果最好，但会破坏Duffy、MNS等抗原，导致漏检。

（1）抗体检测样本应在48小时内完成，避免抗体效价减弱导致漏检。

（2）抗-M抗体的最佳反应pH为6.5，通过用0.1mol/L盐酸调节pH，可使抗-M的格局更清晰。

（3）有些特异性的Rh抗体只与酶处理过的红细胞才能发生凝集，这种抗体被称为唯酶抗体，如抗-c、抗-e、抗-C ^w在常规抗人球蛋白试验中与未处理的红细胞不发生凝集反应，而与酶处理的红细胞产生凝集反应。

（4）抗-Le ^a、抗-Jk ^a抗体在盐水介质中与相应抗原的红细胞反应导致溶血。

应设立自身对照并与抗筛细胞做平行试验，排除自身抗体。

在交叉配血之前进行或与交叉配血试验同时进行，以便尽早发现有临床意义的抗体，避免延误病情。

注意抗筛细胞与鉴定细胞的效期，且结果判读时应注意判读表的批号是否与细胞批号一致。

（1）抗体筛选与鉴定试验阴性不一定意味着被检血清中没有抗体，可能是实验条件和所选用的谱细胞不足而造成的一些低频率抗体或有剂量效应的抗体漏检。

（2）需要使用抗原性更完全和特异性更强的谱细胞做实验，或用敏感度更高的技术做检查。

（3）同时结合临床医生提供的病史资料和其他实验室提供的其他线索，扩大筛查范围。

（1）被检血清与自身细胞、抗筛细胞在盐水介质法、聚凝胺法、抗人球蛋白法试验条件下均无凝集，被检血清中未检出不规则抗体。

（2）被检血清和自身细胞无凝集，和一个或几个抗筛细胞有凝集，说明被检血清中含有不规则抗体，判定为抗体筛查阳性。

（3）被检血清和自身细胞、抗筛细胞都有凝集，说明被检血清中含有自身抗体，或同时含有不规则抗体和自身抗体，需要先对自身抗体进行吸收，排除自身抗体干扰后重新做实验，但需注意近期内有无输血史。若自身对照为混合视野，可能是同种抗体对输入的红细胞发生反应，待检血清中仅含有不规则抗体，没有自身抗体。

（4）若抗体筛查为阳性，要进一步鉴定抗体的特异性。鉴定抗体特异性的方法如下：

1）当被检血清与所有的谱细胞在盐水介质法、聚凝胺法、抗人球蛋白法试验条件下都不反应，则重复抗体筛查试验。如果确实和某个抗筛细胞呈阳性结果，则该抗体可能是低频率抗原或稀有抗原的抗体。

2）当被检血清与所有的谱细胞都反应，则根据反应的不同强度来决定。如果是在特定的实验阶段，有相等的凝集强度，这一抗体可能是针对某个高频率抗原或公共抗原的，要选择缺乏这种高频率抗原的谱细胞重复实验。如果是在不同的实验条件有不同的反应，被检血清中可能存在混合抗体，有多重特异性。

3）当被检血清与一些谱细胞凝集而与另一些谱细胞无凝集，则要采用阴性排除、阳性比较、抗原佐证和概率计算四步法进行。

①排除不可能的特异性：利用不同温度和不同介质下的阴性结果，排除不可能的抗体种类，例如只在盐水中凝集，则判定为IgM类抗体，否则判定为IgG类抗体；利用与一些谱细胞反应阴性的结果，排除这些细胞上带有的抗原的抗体，留下不能排除的抗体。

②初步确定特异性：逐一比较未能排除的抗体哪一个符合被检血清与谱细胞的阳性反应格局，从而初步推断出抗体的特异性，可以参考反应的温度和介质。如盐水介质中出现凝集，一般考虑可能是ABO、MNSs、P等血型系统的抗体，这些抗体往往在4℃有加强作用；在抗人球蛋白介质中出现凝集多考虑是Duffy、Kell、Kidd等血型系统的抗体等。有时候要参考本民族和本地区的不规则抗体的频率。

③验证特异性：红细胞膜上有什么抗原，血清中就不会产生相应的抗体；缺乏什么抗原，才可能会产生什么抗体，因此用相应试剂抗体检测红细胞表面抗原。如对应抗原为阴性，则被检血清中含有该特异性抗体的可能性很大；如为阳性，则可推翻原来判断。但有时确实会出现鉴定出来的特异性抗体与抗原同时存在，此时应怀疑有类抗体的存在。

④通常单一特异性抗体的判定比较容易，但多重（有时多达四五种）特异性抗体的鉴定就比较困难。此时要有熟练的技术和丰富的经验，同时借助其他试验，如中和抑制试验、吸收放散试验、化学药剂、酶处理细胞-抗人球蛋白试验等，并需增加不同格局谱细胞的数量、采用不同的温度、不同pH进行测定。如果仍不能鉴定，可送检至有相应检测能力的实验室进一步确证。

抗体筛查阴性并不一定意味着被检血清中没有抗体，可能是因为实验条件和所选用的谱细胞不足而造成一些有剂量效应的抗体或低频率抗体漏检。

交叉配血方法容易造成弱抗体的漏检，应同时加做抗人球蛋白试验。

（1）红细胞浓度过高造成凝集减弱或红细胞浓度过低造成凝集不易被观察。

（2）试剂保存不当：抗人球蛋白试剂冷冻保存会失去反应活性，过度加热或反复冻融抗人球蛋白试剂都会使其失效。

（3）洗涤不充分：应充分洗涤红细胞，血清加入量过多同时洗涤不充分时也易造成假阴性。