从1890年Robert Koch最早发明旧结核菌素以来，从旧结核菌素发展为纯蛋白衍生物，结核菌素试剂的研发经过了100多年的历史。

1890年，Robert Koch将结核杆菌接种于含5%甘油的牛肉汤，经6～8周37℃培养后，加温100℃约1小时灭菌，然后进行过滤，再将滤液加热80℃蒸发，浓缩至原来体积的1/10，制成了旧结核菌素（old tuberculin，OT），OT制备容易、性质稳定，但生产工艺较为粗糙，主要成分为结核蛋白及其分解产物，同时还包括了一些与活性无关的多糖、核酸、脂类、结核菌代谢产物及培养基中的各种成分，故常造成非特异性反应。1907年，奥地利人V.Pirquet应用Robert Koch制备的OT，发明了结核菌素皮肤刮种方法，以此来诊断结核菌感染和结核病，这是结核菌素试剂在结核感染和结核病诊断的最早应用。

1952年，世界卫生组织（WHO）将旧结核菌素标准化，规定1TU = 1/100mg的国际标准旧结核菌素，即旧结核菌素1mg = 100TU，1ml旧结核菌素= 1000mg，1ml旧结核菌素= 1000 × 100 = 100 000TU（tuberculin unit，结素单位）。

用于制造旧结核菌素的菌种各异，我国主要用人型93004、93009和93001株（即美国34283株）。由于旧结核菌素的特异性不足，早已经被结核菌纯蛋白衍生物所替代而停止使用。

1928年首次提得结核蛋白，1932年F.Seibert用Long氏综合培养基培养，用三氯乙酸沉淀制成实验制品，称纯结核蛋白（TPT）。1934年实际使用的纯结核菌素是用Dorset培养基培养6～8周，经100℃ 3小时杀死，每千克加122ml甘油，热浴蒸发浓缩至1/5，加苯酚防腐，在冷室过滤，再用火棉胶膜超滤，10%三氯乙酸沉淀，去杂质，经无水乙醚脱水得晶体状纯结核蛋白。因其中可能仍有变性蛋白，故称为纯蛋白衍生物（purified protein derivative，PPD）。

1934年Seibert建立硫酸铵盐析法制备PPD。该种方法制备的PPD产品，其多糖、核酸、脂肪含量急剧减少，成为一种富含蛋白质的制剂。1944年，在美国以此种方法制备的PPD（批号：49608）被命名为PPD-S，作为该类型制剂的参考品。由于PPD-S效价和特异性均更强，1952年WHO将PPD-S定为哺乳类国际标准结核菌素，其含量与OT的比较见表1-1。

1955年，WHO与联合国国际儿童基金会（UNICEF）委托丹麦血清研究所生产了一大批PPD产品，定名为PPD-RT23，并推荐为各国进行结核病流行病学调查使用的产品。PPD-RT23是以7株人型结核杆菌所制成，其中E5、E9656、E1580、U1921系原制备RT19-22的菌株，新增加3株T3419、T3480、T3487是从结核病患者中分离出来的菌株。共有95批滤液，其中有18批发现有沉淀而废弃，保留了77批，用乙醚制成混悬液，挥发干燥，保证了混合均匀，提高了蛋白纯度。目前，2TU的PPDRT23被WHO和国际防痨联盟推荐使用，是全球使用最为广泛的PPD产品。

此后，许多国家都研发和生产出各自的PPD，并在PPD字样之后加后缀以示区别。如英国生产为PPD-Weybige，加拿大生产为PPD-CT68，法国生产为PPD-IP48，以及日本生产为PPD-S等。